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你知道氨基酸检测方法都有哪几种吗?

来源: 发布时间:2023-02-18 20:11:33


   氨基酸检测方法

1分光光度氨基酸检测:主要利用衍生物氨基酸发生化学反应生成蓝紫色化合物,在一定波长处有吸收峰,根据吸收值即可得到氨基酸含量茚三酮通常用作衍生剂。分光光度法成本低适用范围广仪器要求简单操作方便,适用于芳香族氨基酸的检测。

 

2毛细管电泳氨基酸检测:根据分离原理不同,可分为毛细管等速电泳毛细管等电点电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管区带电泳和胶束电动毛细管电泳。其中胶束电动毛细管电泳毛细管区带电泳可用于氨基酸检测。毛细管电泳具有溶剂消耗少、分析时间短、分离效率高、无需梯度洗脱等特点,适用于氨基酸的手性分离,但分析结果的重现性较差。  

3近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长范围内跃迁,导致光谱变化,结合统计方法间接实现氨基酸的定量检测。近红外光谱无污染、技术精湛、无损,可以同时检测多种成分。   

4气相色谱法氨基酸检测:氨基酸转化为易气化的物质,根据各成分在固定相流动相中分布系数的不同,可以实现氨基酸的定量分析。气相色谱法不仅可以发现新的氨基酸,还可以检测氨基酸含量,但其缺点是干扰因素多操作复杂特异性差。  

5液相色谱是常用的氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸没有荧光反应紫外吸收,因此需要对样品进行衍生化,将其转化为具有荧光发射紫外吸收的物质。衍生化可分为柱后衍生化柱前衍生化:(1柱前衍生化:样品进入色谱柱前,氨基酸转化为适合反相液相色谱检测的物质。常用的衍生剂有邻苯二甲醛、丹磺酰氯、萘二甲醛等。常用的色谱柱有C18柱、C8柱、CN柱,检测方法有HPLC-FLDHPLC-UVHPLC-MS.2);(2柱后衍生化:样品用离子交换柱分离,分离的氨基酸衍生化。常用的柱后衍生试剂有茚三酮和氟胺,氟胺的灵敏度比茚三酮高三个数量级左右。柱后衍生主要用于食品、生理液体中氨基酸蛋白质水解物的测定。


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